Ksantoproteinovaya reyaksyon a pwoteyin: siy ak ekwasyon fòmil

Yo nan lòd yo etabli konpozisyon sa a kalitatif nan manje anpil moun itilize reyaksyon ksantoproteinovaya nan pwoteyin lan. Prezans nan aromat asid amine nan melanj la pral chanje nan yon koulè Egzanp Egzamen pozitif.

Ki sa ki se pwoteyin

Li se tou rele yon pwoteyin, ki se yon materyèl bilding pou kò ki vivan an. Pwoteyin kenbe gwosè nan misk, retabli estrikti yo blese ak mouri tisi nan ògàn divès kalite, se pou li cheve, po ak ligaman. Avèk patisipasyon yo, pwodui globules san wouj, ki reji pa operasyon an nòmal nan òmòn anpil ak selil sistèm iminitè.

Sa a se yon molekil konplèks ki se yon polipèptid gen yon mas ki pi konsekan pase 6 ~ 10 ³ dalton. estrikti Pwoteyin fòme résidus asid amine nan yon gwo kantite makonnen kosyon peptides.

Estrikti a nan pwoteyin

Karakteristik nan diferan nan sibstans sa yo konpare ak peptides ki ba pwa molekilè se yo ke yo devlope yon estrikti ki genyen twa dimansyon espasyal, te sipòte efè ak degre yo varye atraksyon. Pwoteyin posede kat-estrikti. Pou chak nan yo gen karakteristik pwòp li yo.

Kòm baz la nan òganizasyon an prensipal nan molekil sa yo sòti asid amine sekans, estrikti ki rekonèt reyaksyon ksantoproteinovaya nan pwoteyin lan. Estrikti sa a se yon detanzantan repete kosyon peptides -HN-CH-ko-, se yon selektif radikal pati yo chenn yo bò nan asid amine. Yo defini pwopriyete plis nan sibstans la kòm yon antye.

Se estrikti a pwoteyin prensipal konsidere kòm fò ase, sa a se akòz prezans nan entèraksyon fò kovalan nan lyezon peptides. Fòmasyon nan nivo ki vin apre rive depann sou atribi ki mete nan etap inisyal la.

fòmasyon an nan estrikti a segondè se posib akòz trese nan sekans nan asid amine nan yon espiral, nan ki lyezon idwojèn yo etabli ant vire yo.

Tètyè òganizasyon nivo nan molekil ki te fòme pa aplike youn nan yon espiral sou fragman yo lòt ak ensidan an nan tout koneksyon posib ant yo, ak idwojèn, bisulfur, kovalan oswa iyonik konpoze. Rezilta a se asosyasyon an nan fòm lan nan globules.

Aranjman an espasyal nan estrikti yo Supérieure ak fòmasyon nan lyezon chimik ant yo mennen nan fòmasyon an nan fòm final la nan molekil la oswa nivo kwatèrnèr.

asid amine

Yo lakòz pwopriyete yo pwodui chimik nan pwoteyin. Genyen apeprè 20 pi gwo asid amine fè moute polipèptid yo nan yon sekans diferan. Sa a tou se refere ra asid aminocarboxylic nan idroksiprolin nan fòm ak hydroxylysine sòti debaz peptides.

Kòm yon siy nan reyaksyon pwoteyin rekonesans ksantoproteinovaya, prezans nan sèten asid amine bay chanjman nan koulè nan réactifs, sijere ke nan prezans nan estrikti espesifik nan konpozisyon yo.

Kòm li yo te tounen soti yo, yo se asid aminokarboksilik ki te fèt sibstitisyon nan idwojèn atòm sou gwoup la amine.

Yon estrikti egzanp sou molekil la ka fè sèvis pou yon fòmil estriktirèl glisin (HNH- HCH- COOH) kòm senp asid la amine.

Nan ka sa a youn nan hydrogens yo CH ₂ - kapab ranplase pa yon kabòn ankò radikal comprenant yon bag benzèn, amine, sulfo, karboksi.

Ki sa reyaksyon ksantoproteinovaya

Pou kalitatif analiz de pwoteyin lè l sèvi avèk teknik divès kalite. Men sa yo enkli reyaksyon:

• biuret ak aparans nan koulè vyolèt;
• ninhydrin yo fòme yon solisyon ble-vyolèt;
• fòmaldeyid ak etablisman an nan yon koulè wouj;
• Nogier provoqués koulè a gri-nwa.

Nan pote soti chak metòd pwouve prezans nan pwoteyin ak prezans nan sèten gwoup fonksyonèl nan molekil yo.

Gen ksantoproteinovaya reyaksyon a pwoteyin nan. Li se tou rele pann an Mulder. Li refere a reyaksyon yo koulè pou pwoteyin, nan ki gen aromat ak etero asid amine.

Yon karakteristik tout moun ki tankou pwosesis echantiyon yon se nitrasyon nitrique asid résidus siklik asid amine an patikilye asansyon la nan gwoup la nitro nan bag la benzèn.

Rezilta a nan pwosesis sa a se fòmasyon an nan konpoze nitro, ki presipite. Sa a se reyaksyon an debaz karakteristik ksantoproteinovaya.

Ki sa ki detèmine asid la amine

Pa ka tout asid aminocarboxylic dwe detekte lè l sèvi avèk tankou yon echantiyon. Karakteristik nan prensipal nan ksantoproteinovaya pwoteyin reyaksyon deteksyon - prezans nan bag la benzèn oswa bag etero nan molekil asid amine yo.

Paske se pwoteyin ki izole nan asid aminocarboxylic de aromat, nan ki gen se yon gwoup fenil (pou fenilalanin), ak yon idroksifenil radikal (nan tirozin).

Avèk se reyaksyon ksantoproteinovaya detèmine etero amine asid triptofan, endol gen yon nwayo aromat. Prezans nan konpoze sa yo pi wo a nan pwoteyin a bay chanjman nan koulè karakteristik nan anviwònman an egzamen an.

Ki sa ki itilize réactifs

Pou pote soti reyaksyon an ksantoproteinovaya bezwen prepare yon solisyon 1% nan pwoteyin ze, oswa orijin legim.

Anjeneral yo itilize ze, ki se divize pou separasyon plis nan pwoteyin ki soti nan jònze a. Pou yon solisyon 1% nan pwoteyin te dilye nan yon kantite lajan Dix nan dlo fè sèvis pou mete. Apre yap divòse nan likid la ki kapab lakòz pwoteyin yo ta dwe filtre nan plizyè kouch fwomaj. Sa a solisyon yo ta dwe estoke nan yon kote ki fre.

Li se posib pote soti nan reyaksyon an ak yon pwoteyin legim. Pou prepare solisyon an se itilize farin ble nan yon kantite lajan nan 0.04 kg. 0.16 l nan dlo fè sèvis pou mete. engredyan yo te melanje nan yon flakon ki se mare pou 24 èdtan nan yon kote ki fre nan yon tanperati ki nan sou + 1 ° C. Nan fen jou a te solisyon an tèt, ki te swiv pa filtrasyon ladan l 'premye ak lenn mouton koton ak sa a, - yon papye ki plwaye filtre. likid la ki kapab lakòz te kenbe nan yon kote ki fre. Solisyon sa a se sitou prezan nan fraksyon nan albumin.

Pou pote soti ksantoproteinovaya reyaksyon an kòm prensipal reaktif itilize konk nan nitrique asid. Pli lwen réactifs ki se yon solisyon nan 10% SODIUM sodyòm oswa amonyak, solisyon an jelatin ak unconcentrated PHENOL.

metodoloji a nan nan

Nan yon tib pwòp se te fè 1% solisyon pwoteyin ze th oswa farin frans nan yon kantite lajan nan 2 ml. Pou sa se ajoute sou 9 gout nan asid konsantre nitrique flokulasyon sispann. Te melanj lan ki kapab lakòz chofe, sa ki lakòz jòn provoqués piti piti disparèt ak koulè li yo ale nan solisyon an.

Lè likid la refwadi desann nan tib la ansanm miray ranpa a te ajoute sou 9 gout nan SODIUM sodyòm, konsantre, ki se depase pou pwosesis la. mwayen nan reyaksyon vin asid. Content vin koulè zoranj nan tib la egzamen an.

karakteristik nan

Depi ksantoproteinovaya rele kalitatif reyaksyon a nitrique asid pa aksyon an nan pwoteyin yo, se echantiyon an fè anba enkli kapo vapè. Obsève tout prekosyon sekirite lè w ap travay ak konsantre sibstans ki sou mordan.

Liberasyon an nan sa ki soti nan tib la ka rive pandan pwosesis la chofaj ki dwe konsidere kòm lè repare-l nan yon detantè epi chwazi enklinasyon la.

Konpoze nan asid konsantre nitrique ak soda mordan ta dwe sèlman sèvi ak yon pipète vè ak pwa kawotchou entèdi pipète nan bouch.

Relative reyaksyon ak PHENOL

Pou klè, pwosesis ak yon konfimasyon pou prezans nan gwoup yo fenil se te pote soti ak yon hydroxybenzene echantiyon menm jan an.

tib la fè 2 mL dilye PHENOL, lè sa a piti piti ansanm miray la, te ajoute 2 mL nan asid konsantre nitrique. Te solisyon an sibi chofaj, annakò ak sa li vin jòn. reyaksyon sa a se bon jan kalite a nan prezans nan bag la benzèn.

hydroxybenzene Pwosesis nitre ak asid nitrique ki te swiv pa fòmasyon nan yon melanj de p nitrofenol-yo ak o-nitrofenol nan yon pousantaj nan 15 a 35.

tès konparezon ak jelatin

Pou pwouve ke reyaksyon ksantoproteinovaya nan pwoteyin la revele yon asid amine ak estrikti aromat, sèvi ak pwoteyin ki pa gen yon gwoup fenol.

Nan yon tib pwòp se te fè 1% solisyon jelatin nan yon kantite lajan nan 2 ml. Pou sa se ajoute sou 9 gout nan asid konsantre nitrique. Melanj lan ki kapab lakòz se chofe. Solisyon an pa t 'gen koulè pal nan jòn, ki pwouve absans la nan asid amine ak yon estrikti aromat. Pafwa gen yon jòn ti tay nan anviwònman an akòz prezans la nan enpurte pwoteyin.

ekwasyon chimik

Nan de reyaksyon an etap kouri ksantoproteinovaya pwoteyin. Fòmil premye pwosesis nitrasyon etap dekri amine molekil asid lè l sèvi avèk konsantre nitrique asid.

Yon egzanp se atachman a nan gwoup la nitro tirozin nan yo fòme nitrotyrosine ak dinitrotirozina. Nan pwemye ka a nan bag la benzèn se tache yon sèl NO ₂ -radical, ak konpoze nan dezyèm gen de atòm idwojèn yo ranplase pa NO _2. Chimik fòmil ksantoproteinovaya tirozin reyaksyon reprezante pa reyaksyon ak asid nitrique yo fòme nitrotyrosine molekil.

se pwosesis nitrasyon akonpaye pa tranzisyon san koulè koloran nan ton jòn. Nan pote soti reyaksyon sa a ak pwoteyin ki gen asid la amine résidus fenilalanin oswa triptofan, ak koulè nan chanjman ki nan solisyon an.

Dezyèm etap la se pwodwi a reyaksyon nan nitrasyon nan molekil tirozin, patikilyèman nitrotyrosine, ak amonyòm oswa SODIUM sodyòm. Rezilta a se yon sodyòm oswa amonyòm sèl nan ki koulè a jòn-zoranj. Se tankou yon reyaksyon ki gen rapò ak posibilite pou molekil nitrotyrosine avanse pou pi nan fòm lan quinoid. Imedyatman SALT fòme sa mande asid nitronic, ki te gen yon sistèm kinon nan obligasyon Couplet doub.

Se konsa fini reyaksyon ksantoproteinovaya pwoteyin. ekwasyon an prezante pi wo a dezyèm etap.

rezilta

Pandan analiz la nan likid ki nan twa tib yo, se solisyon an referans dilye ak PHENOL. Sibstans ki sou ak yon bag benzèn bay kalitatif reyaksyon ak asid nitrique. Kòm yon rezilta, li chanje koulè nan solisyon an.

Kòm se li te ye, jelatin konprann yon fòm idrolize nan kolagen an. pwoteyin nan pa gen estrikti nan aromat nan asid amine yo. Pa gen chanjman nan koulè nan mwayen an pa reyaksyon ak yon asid.

Nan tib la tès twazyèm gen yon reyaksyon pozitif nan pwoteyin ksantoproteinovaya. ka Konklizyon dwe desine jan sa a: tout pwoteyin ak estrikti aromat, si li ka yon gwoup fenil oswa yon bag endol, yo bay chanjman ki fèt nan koulè nan solisyon an. Sa a se akòz fòmasyon nan konpoze nitro ak yon koulè jòn.

Pote soti yon reyaksyon koulè pwouve prezans nan divès kalite estrikti chimik nan asid amine ak pwoteyin. EGZANP jelatin montre ke konpozisyon li yo gen ladan asid aminocarboxylic pa gen yon gwoup fenil oswa yon estrikti siklik.

Avèk reyaksyon ksantoproteinovaya kapab eksplike pa jòn nan po a lè aplike nan li yon asid fò nitrique. koulè a menm yo ap vin Delice lèt pandan analiz menm jan an li.

Nan pratik laboratwa klinik sa a echantiyon koulè se pa sa yo itilize pou deteksyon an nan pwoteyin nan pipi a. Sa a se akòz koulè a jòn nan pipi nan tèt li.

Ksantoproteinovaya reyaksyon te vin de pli zan pli itilize pou dozaj nan asid amine tankou triptofan ak tirozin, kòm yon pati nan divès kalite pwoteyin.